Porcint akutt diarésyndrom Coronavirus (SADS-CoV) er et nyoppdaget enterisk patogent koronavirus som kan forårsake vannaktig diaré hos nyfødte smågriser og forårsake betydelige økonomiske tap for svinenæringen.For tiden er det ingen egnet serologisk metode for å evaluere effektiviteten av SADS-CoV-infeksjon og vaksine, så det er et presserende behov for å bruke en effektiv enzymkoblet immunosorbentanalyse (ELISA) for å kompensere for denne mangelen.Her ble et rekombinant plasmid som uttrykker SADS-CoV spike (S)-protein fusjonert med humant IgG Fc-domene konstruert for å produsere rekombinant baculovirus og uttrykt i HEK 293F-celler.S-Fc-proteinet renses med protein G-harpiks og beholder reaktiviteten med anti-humane Fc- og anti-SADS-CoV-antistoffer.Deretter ble S-Fc-protein brukt til å utvikle indirekte ELISA (S-iELISA) og optimalisere reaksjonsbetingelsene til S-iELISA.Som et resultat, ved å analysere OD450nm-verdien til 40 SADS-CoV-negative sera bekreftet ved immunfluorescensanalyse (IFA) og Western blotting, ble grenseverdien bestemt til å være 0,3711.Variasjonskoeffisienten (CV) for de 6 SADS-CoV-positive seraene innenfor og mellom kjøringer av S-iELISA var alle mindre enn 10 %.Kryssreaktivitetstesten viste at S-iELISA ikke har noen kryssreaktivitet med andre svinevirussera.I tillegg, basert på påvisning av 111 kliniske serumprøver, var den totale sammenfallsraten for IFA og S-iELISA 97,3 %.Virusnøytraliseringstesten med 7 forskjellige OD450nm-verdier av serum viste at OD450nm-verdien påvist ved S-iELISA var positivt korrelert med virusnøytraliseringstesten.Til slutt ble S-iELISA utført på 300 serumprøver fra grisefarm.Kommersielle sett med andre enterovirus fra svin viste at de IgG-positive ratene av SADS-CoV, TGEV, PDCoV og PEDV var henholdsvis 81,7 %, 54 % og 65,3 %., henholdsvis 6 %.Resultatene viser at S-iELISA er spesifikk, sensitiv og reproduserbar, og kan brukes til å oppdage SADS-CoV-infeksjon i svinenæringen.Denne artikkelen er beskyttet av opphavsrett.alle rettigheter forbeholdt.
Innleggstid: 22. juni 2021